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DNeasy Blood Tissue Kit(250)qiagen試劑盒 分子生物試劑

  • 更新時(shí)間:  2023-07-27
  • 產(chǎn)品型號:  69506
  • 簡單描述
  • DNeasy Blood Tissue Kit(250)qiagen試劑盒
    從動(dòng)物血液和組織、細(xì)胞、酵母、細(xì)菌或者病毒中純化總DNA

    為各種類型樣本提供標(biāo)準(zhǔn)化的純化方法
    即使是特殊類型起始樣本也可以獲得高產(chǎn)量DNA
    高品質(zhì)DNA
    經(jīng)過優(yōu)化的操作方法適合處理多種起始樣本
    可選擇離心柱方式或96孔板高通量方式
詳細(xì)介紹

DNeasy Blood Tissue Kit(250)qiagen試劑盒



從動(dòng)物血液和組織、細(xì)胞、酵母、細(xì)菌或者病毒中純化總DNA

  • 為各種類型樣本提供標(biāo)準(zhǔn)化的純化方法

  • 即使是特殊類型起始樣本也可以獲得高產(chǎn)量DNA

  • 高品質(zhì)DNA

  • 經(jīng)過優(yōu)化的操作方法適合處理多種起始樣本

  • 可選擇離心柱方式或96孔板高通量方式

DNeasy Blood & Tissue Kit采用基于硅膠膜技術(shù)的離心柱或96孔板方式快速方便的純化DNA。大多數(shù)樣本可直接用蛋白酶K消化處理,無需機(jī)械破碎,減少了手動(dòng)操作時(shí)間。為特殊樣本提供優(yōu)化的純化方法,獲得高重復(fù)性、高純度的DNA,用于生物研究、基因型分析和獸醫(yī)病理研究。DNA純化流程可以使用DNeasy Blood & Tissue Kit,在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀上自動(dòng)化進(jìn)行。


DNeasy Blood Tissue Kit(250)qiagen試劑盒


DNA產(chǎn)量。

使用DNeasy Blood & Tissue Kit從100 µl全血中純化DNA。羊:從50 µl羊全血中純化DNA。使用超過50 µl的羊血時(shí),DNA產(chǎn)量沒有明顯增加。雞:從5 µl雞全血中純化DNA。鳥類血液中含有核紅細(xì)胞,因此其DNA產(chǎn)量比哺乳動(dòng)物的高。

DNeasy Mini和96實(shí)驗(yàn)流程。


高效的16重PCR。

使用DNeasy Blood & Tissue Kit從人類K562細(xì)胞中純化基因組DNA。使用QIAGEN Multiplex PCR Kit對圖示量的DNA和16對引物進(jìn)行多重PCR,反應(yīng)平行進(jìn)行兩次。M: 100 bp ladder。

高品質(zhì)DNA。

使用DNeasy Blood & Tissue Kit從圖示的動(dòng)物樣本中純化DNA,并進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳分析。對于每個(gè)樣本,都對0.5 µg未經(jīng)過酶處理的DN(左側(cè))、或1 µg經(jīng)過EcoRI處理的DNA(右側(cè))進(jìn)行了分析。M: lambda-HindIII。

對馬進(jìn)行基因分型。

從三批棕色馬的鬃毛中純化獲得DNA,并使用MSH和ASIP PCR對毛色基因型進(jìn)行分析。[A] MSH PCR產(chǎn)物用TaqI酶處理。馬1和2確定為Ee雜合體,攜帶紅色毛色的隱性等位基因e。[B]對ASIP PCR產(chǎn)物分析得出,馬1和2為Aa雜合體,攜帶黑色毛色的隱性等位基因a。+:黑色馬Ee aa陽性對照。–陰性對照。M:標(biāo)記物。

高通量純化。

使用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit從24個(gè)小鼠尾和24個(gè)大鼠尾樣本中純化DNA。在1%的瓊脂糖凝膠上進(jìn)行DNA電泳分析。M: lambda-HindIII。

Real-time PCR。

Borrelia sp.是由蜱攜帶的病原體,可導(dǎo)致人類或其他哺乳動(dòng)物患萊姆病。使用DNeasy Blood & Tissue Kit從蜱中純化DNA。在LightCycler儀器上使用artus Borrelia LC PCR Kit,通過real-time PCR檢測Borrelia DNA。陽性樣本曲線的最di處對應(yīng)每次PCR反應(yīng)5個(gè)拷貝DNA。

對豬進(jìn)行基因分型。

使用DNeasy Blood & Tissue Kit從豬耳刻樣本中純化DNA,然后使用Biotype AG公司的Animaltype Pig PCR Amplification Kit和QIAGEN HotStarTaq DNA Polymerase進(jìn)行擴(kuò)增。電泳圖顯示:12個(gè)多態(tài)性四核苷酸微衛(wèi)星和一個(gè)性別鑒定標(biāo)記物(SBH23)的遺傳指紋圖譜。



性能

高效的DNeasy Blood & Tissue操作流程能夠從動(dòng)物血液和組織樣本中純化大量的總DNA。優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)方案可確保非標(biāo)準(zhǔn)樣本的高產(chǎn)量,如動(dòng)物毛發(fā)和培養(yǎng)細(xì)胞、固定的組織,或者革蘭氏陽性和陰性細(xì)菌。獨(dú)te的在線實(shí)驗(yàn)方案參考文庫,可從酵母、昆蟲、毛發(fā)和其他類型樣本中純化DNA。

使用DNeasy Blood & Tissue Kits從動(dòng)物組織中純化的DNA產(chǎn)量
樣本來源樣本量DNA(µg)
哺乳動(dòng)物血液100 µl3–6
鳥類血液5 µl9–40
HeLa細(xì)胞2 x 10615–25
肝臟25 mg10–30
25 mg15–30
腎臟25 mg15–30
脾臟10 mg5–30
小鼠尾1.2 cm(尾部)10–25
大鼠尾0.6 cm(尾部)20–40
豬耳25 mg10–30
馬毛10 根毛發(fā)2–4
魚鰭20 mg10–20
魚卵(鯖魚)10 mg5–10

DNeasy Blood & Tissue Kits簡化了從多種樣本類型中純化DNA的流程,包括在生命科學(xué)、獸醫(yī)學(xué)和基因分型研究應(yīng)用中常見的動(dòng)物種類。純化得到的DNA不含PCR抑制劑,能在標(biāo)準(zhǔn)多重real-time PCR中進(jìn)行靈敏的檢測。DNeasy Blood & Tissue Kits確保了可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,從轉(zhuǎn)基因小鼠的實(shí)驗(yàn)室分析到家畜的育種項(xiàng)目和種系基因分型研究。可以用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit方便地?cái)U(kuò)大常規(guī)的檢測應(yīng)用的規(guī)模。

原理

DNeasy Blood & Tissue Kit適用于從不同的樣本中,包括新鮮或冷凍的動(dòng)物組織和細(xì)胞、血液或者細(xì)菌,快速純化總DNA(如,基因組、線粒體和病原體等)。

DNeasy膜整合了硅膠膜的結(jié)合特性,經(jīng)簡單顯微離心技術(shù)或者QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System處理即可。在高濃度離液鹽的環(huán)境中,DNA吸附在DNeasy膜上,可以除去溶液中水合分子的水分。DNeasy Blood & Tissue操作流程中設(shè)計(jì)的緩沖液條件,旨在使DNA特異性吸附到硅膠膜上,并且優(yōu)化去除污染物和酶抑制劑。

純化過程不需要苯fen或氯仿抽提或乙醇沉淀,僅涉及少量手工步驟。這使得DNeasy Blood & Tissue Kits非常適合同時(shí)處理多個(gè)樣本。對于高通量的應(yīng)用,DNeasy 96 Blood & Tissue Kit能夠同時(shí)處理96或192個(gè)樣本。

操作流程

可靠的硅膠膜技術(shù),利用便捷的離心柱或96孔板形式,確保了快速可重復(fù)的DNA純化,不再需要有機(jī)抽提和乙醇沉淀。樣本首先用蛋白酶K裂解。調(diào)整緩沖條件,以提供的DNA結(jié)合條件并將裂解物上樣到DNeasy Mini離心柱或DNeasy 96孔板上。在離心過程中,DNA選擇性地結(jié)合到DNeasy膜上,污染物通過。余下的污染物和酶抑制劑將在兩個(gè)高效的洗滌步驟中被去除。然后,用水或緩沖液將DNA洗脫,待用。  

DNeasy Mini離心柱預(yù)裝在收集管中,并且單獨(dú)封存,確保方便和安全。使用DNeasy Mini離心柱的純化過程可在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀上自動(dòng)進(jìn)行。DNeasy 96 Blood & Tissue Kit可使用QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System以96孔板形式進(jìn)行高通量處理。

應(yīng)用

DNeasy Blood & Tissue Kits提供高品質(zhì)DNA,可直接用于多種下游分析,包括:

  • 生命科學(xué)研究 

  • 家畜育種

  • 種系基因分型研究 

  • 獸醫(yī)病理分析研究 

  • 常規(guī)的應(yīng)用檢測 

特點(diǎn)
參數(shù)
ApplicationsPCR, real-time PCR, genotyping
Elution volume100–200 µl
Format96-well plate, spin column
Main sample typeBlood, tissue
ProcessingManual
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or proteinDNA
Sample amount100 µl/25 mg
TechnologySilica technology
Time per run or per prep20 minutes – 1 hour
Yield6 µg/30 µg
  • 目錄號:69506

  • 品牌:Qiagen

  • 規(guī)格:250Reactions

  • 目錄價(jià):¥9070.00

  • 市場價(jià)格:¥7709.50

  • 會(huì)員價(jià)格:¥7709.50

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